Kazalo:

Poceni fluorescenčni in svetlobni mikroskopi: 9 korakov (s slikami)
Poceni fluorescenčni in svetlobni mikroskopi: 9 korakov (s slikami)

Video: Poceni fluorescenčni in svetlobni mikroskopi: 9 korakov (s slikami)

Video: Poceni fluorescenčni in svetlobni mikroskopi: 9 korakov (s slikami)
Video: Часть 1 — Аудиокнига Герберта Уэллса «Война миров» (книга 1 — главы 1–12) 2024, November
Anonim
Image
Image
Poceni fluorescenčni in Brightfield mikroskopi
Poceni fluorescenčni in Brightfield mikroskopi
Poceni fluorescenčni in Brightfield mikroskopi
Poceni fluorescenčni in Brightfield mikroskopi

Projekti Fusion 360 »

Fluorescenčna mikroskopija je način slikanja, ki se uporablja za vizualizacijo posebnih struktur v bioloških in drugih fizikalnih vzorcih. Predmeti, ki nas zanimajo v vzorcu (npr. Nevroni, krvne žile, mitohondriji itd.), So vizualizirani, ker se fluorescenčne spojine vežejo samo na te posebne strukture. Nekatere najlepše mikroskopske slike so zbrane s fluorescenčnimi mikroskopi; si oglejte te slike, predstavljene na spletni strani Nikon MicroscopyU, če si želite ogledati nekaj primerov. Fluorescenčna mikroskopija je uporabna za številne biološke študije, ki se osredotočajo na določeno strukturo ali tip celice. Na primer, številne raziskovalne študije o nevronih v možganih so odvisne od uporabe fluorescenčne mikroskopije, ki natančno prikazuje nevrone.

V tem navodilu bom pregledal osnovna načela fluorescenčne mikroskopije in kako sestaviti tri različne poceni fluorescenčne mikroskope. Ti sistemi običajno stanejo na tisoče dolarjev, vendar so bila v zadnjem času prizadevanja za njihovo lažjo dostopnost. Modeli, ki jih predstavljam tukaj, uporabljajo pametni telefon, dSLR in USB mikroskop. Vsi ti modeli delujejo tudi kot svetlobni mikroskopi. Začnimo!

1. korak: Pregled fluorescenčne mikroskopije

Pregled fluorescenčne mikroskopije
Pregled fluorescenčne mikroskopije
Pregled fluorescenčne mikroskopije
Pregled fluorescenčne mikroskopije

Če želite razumeti osnovno idejo fluorescenčne mikroskopije, si zamislite debel gozd ponoči, poln dreves, živali, grmovja in vsega drugega, kar živi v gozdu. Če v gozd prižgete svetilko, vidite vse te strukture in težko si je predstavljati določeno žival ali rastlino. Recimo, da ste v gozdu zanimali le ogled grmovnic borovnic. Da bi to dosegli, trenirate kresnice, da jih pritegnejo le grmičevje borovnic, tako da se ob pogledu v gozd prižgejo le grmičevje borovnic. Lahko bi rekli, da ste borovničevo grmovje označili s kresnicami, da si lahko ogledate le borovničeve strukture v gozdu.

V tem analogu gozd predstavlja celoten vzorec, borovničevo grmovje predstavlja strukturo, ki jo želite vizualizirati (npr. Določeno celico ali podcelično organelo), kresnice pa so fluorescenčna spojina. Primer, v katerem svetiš samo z svetilko brez kresnic, je analogen mikroskopiji s svetlim poljem.

Naslednji korak je razumevanje osnovne funkcije fluorescenčnih spojin (imenovanih tudi fluoroforji). Fluoroforji so res majhni predmeti (na lestvici nanometrov), zasnovani za pritrditev na določene strukture v vzorcu. Absorbirajo svetlobo v ozkem razponu valovnih dolžin in ponovno oddajajo drugo valovno dolžino svetlobe. Na primer, en fluorofor lahko absorbira modro svetlobo (tj. Fluorofor se vzbudi z modro svetlobo) in nato ponovno oddaja zeleno svetlobo. Običajno je to povzeto s spektrom vzbujanja in emisij (slika zgoraj). Ti grafi prikazujejo valovno dolžino svetlobe, ki jo fluorofor absorbira, in valovno dolžino svetlobe, ki jo fluorofor oddaja.

Zasnova mikroskopa je zelo podobna običajnemu mikroskopu s svetlim poljem z dvema glavnima razlikama. Najprej mora biti svetloba za osvetlitev vzorca valovna dolžina, ki vzbuja fluorofor (na primer zgoraj je bila svetloba modra). Drugič, mikroskop mora zbrati samo emisijsko svetlobo (zeleno luč), hkrati pa blokirati modro. To je zato, ker modra svetloba gre povsod, zelena pa le iz posebnih struktur v vzorcu. Za blokiranje modre svetlobe ima mikroskop običajno nekaj, kar se imenuje longpass filter, ki omogoča, da zelena svetloba prehaja brez modre svetlobe. Vsak longpass filter ima mejno valovno dolžino. Če ima svetloba daljšo valovno dolžino kot meja, lahko preide skozi filter. Od tod tudi ime "longpass". Krajše valovne dolžine so blokirane.

Tu je nekaj pregledov fluorescenčne mikroskopije:

bitesizebio.com/33529/fluorescence-microsc…

www.microscopyu.com/techniques/fluorescenc…

www.youtube.com/watch?v=PCJ13LjncMc

2. korak: modeliranje mikroskopov z optiko Ray

Modeliranje mikroskopov z optiko Ray
Modeliranje mikroskopov z optiko Ray
Modeliranje mikroskopov z optiko Ray
Modeliranje mikroskopov z optiko Ray

Podprvak na tekmovanju optike

Priporočena: